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较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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抗生素 Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A

抗生素 Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A

型    号: 630466
报    价: 950
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抗生素 Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A也称为短梗霉素A,一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106的环酯肽类抗真菌抗生素,金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶(Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase)活性,阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成。

630466抗生素 Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A的详细资料:



Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A

——Clontech/Takara 酵母菌/真菌转化实验选择性抗生素/酵母单杂交/双杂交研究

搜索关键词:选择性抗生素;酵母菌转化系统【酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】;真菌转化系统【构巢曲霉、黑曲霉】;酵母单杂交/双杂交;AUR1基因;AURA基因;IPAC合成酶;AUR1-C突变基因

基本描述:

金担子素AAureobasidin AAbA),也称为短梗霉素A,一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106的环酯肽类抗真菌抗生素,在较低浓度(0.1-0.5μg/ml)下即可对酵母菌产生毒性,对该抗生素敏感的真菌包括:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(Aspergillus niger.)。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶(Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase)活性,阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成,导致鞘脂类物质的合成量不足,细胞膜破裂,进而杀死菌株。研究发现,来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性,都能够编码IPC合成酶,对这两种基因的点突变,也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性,比如:突变基因AUR1-C

AbA用作选择性标记的应用和优势:

  1. 酵母转化研究中,金担子素AAbA)是一种非常有效的选择性标志;
  2. 使用上基本不需优化条件,且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子,兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统,并提供良好的筛选结果。

携带AbA抗性基因(AUR1-C)的商业化载体:

  1. 大肠杆菌-酵母菌穿梭载体/大肠杆菌-曲霉穿梭载体(shuttle vector

简单描述:pAUR载体系统包含六种大肠杆菌-酵母菌穿梭载体,每一种特别改造用于酿酒酵母、粟酒裂殖酵母或者构巢曲霉,这些载体都涵盖一个新型的药物抗性选择性标志(金担子素Aureobasidin A抗性),使得酵母菌或丝状真菌具有此抗性。

【各载体及其特点详见Mangkangbio

  1. 酵母报告基因载体(yeast reporter vector

载体名称

特点

备注

pAbAi Vector

用于单杂交(one-hybrid)实验的酵母报告载体,可用来鉴定和分类DNA结合蛋白。特别设计兼容于Matchmaker Gold 酵母单杂交筛选系统,顺式作用元件(靶向序列)可插入MCS用作诱饵以筛选GAL4 AD/cDNA融合文库;目标蛋白-DNA的相互作用驱动AUR1-C抗性基因表达,从而能筛选到AbA抗性酵母;

Matchmaker Gold

酵母单杂交系统

p53-AbAi Vector

酵母报告载体,配合Matchmaker Gold 酵母单杂交筛选系统的阳性对照载体;含p53结合序列(顺式作用元件);AbA抗性基因AUR1-C的表达受GAL4 AD-p53p53结合序列的相互作用而诱发;p53-AbAi在酵母细胞内不能游离繁殖,仅当整合进入宿主染色体才可以稳定存在,通过载体上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus发生同源重组以实现整合。另,含Col E1复制起始子和AmpR,可实现大肠杆菌内的扩增和复制。

 

基本特性:

  1. 同义名:短梗霉素A
  2. 分子式:C60H92N8O11
  3. 分子量:1100 Da
  4. 纯度:≥95%
  5. 熔点:155-157

6)   溶解性:不溶于水,易溶于甲醇、乙醇(0.5-5mg/ml

 

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630466

Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies

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抗生素 Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A

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