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较早公告: CCK-8细胞增殖及毒性检测的步骤详细说明1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱guo夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CC
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寡霉素(Oligomycin)线粒体ATP合成酶抑制剂的有用知识交流
点击次数:450 发布时间:2018-08-21

关于寡霉素Oligomycin的一些有用知识点

 

1、寡霉素(oligomycin)的来源是什么?

回答(MKBio):寡霉素最早于1953年从淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)分离并被鉴定,自此之后从大量的其他链霉菌属中都有被发现。于1986年在英国曼彻斯特被合成,科学家使用简单的碳化合物(乙酸、丁酸和丙酸酯),用C13标记,把这些化合物加入反应池内,之后提取出寡霉素,然后检测C13所处位置。通过此方法,科学家发现寡霉素是由含碳的更小的简单分子一片一片的组装起来。

 

2、寡霉素(oligomycin)的生物结构是什么?

回答(MKBio):目前发现的寡霉素同分异构体有很多种,包括异构体AB,C,D,E等等。具体结构见下表。

 

R1

R2

R3

R4

R5

Oligomycin A

CH3

H

OH

H, H

CH3

Oligomycin B

CH3

H

OH

O

CH3

Oligomycin C

CH3

H

H

H, H

CH3

Oligomycin D

(Rutamycin A)

H

H

OH

H, H

CH3

Oligomycin E

CH3

OH

OH

O

CH3

Oligomycin F

CH3

H

OH

H, H

CH2CH3

Rutamycin B

H

H

H

H, H

CH3

44-Homooligomycin A

CH2CH3

H

OH

H, H

CH3

44-Homooligomycin B

CH2CH3

H

OH

O

CH3

 

3、寡霉素(oligomycin)的靶向特性?

回答(MKBio):原核生物和真核生物内含各种离子(质子)转运的ATP酶(ATPases,这些酶划分为三大类:F型(F-type)、V型(V-type)和P型(P-type)。线粒体H+-ATPase属于F-type,称作F-ATPaseATP合酶(ATP synthase)(某些场合)。其他F-type H+-ATPase,存在于细菌叶绿体类囊体膜和内膜(并非某些光合作用细菌),不具有寡霉素敏感性(oligomycin-insensitive)。

Na+, K+-ATPase属于P-type。某些情况下,这类酶称为钠泵。其他P-type ATPases,包括Ca2+-ATPaseH+, K+- ATPase,分别位于肌质网膜和胃细胞膜,不具有寡霉素敏感性(oligomycin-insensitive)。V-type H+-ATPase,位于真核生物的亚细胞颗粒膜,比如液泡和溶酶体,也不具有寡霉素敏感性(oligomycin-insensitive)。

 

4、寡霉素如何抑制mitochondrial H+-ATPase

回答(MKBio):线粒体H+-ATPasemitochondrial H+-ATPase)以偶联在完整线粒体呼吸电子流上的ATP合酶的方式发挥作用。酵母线粒体ATPase对寡霉素的敏感性会差于哺乳动物来源线粒体ATPase。通常以每mg ATPase需要一定量寡霉素的方式来表示抑制效率。F-type H+-ATPase由两个部分组成:F1F0部分,F1部分是一个寡聚体,由5个不同的亲水亚基组成(命名为abgde),并包含用于合成或水解ATP的催化中心。F0部分是一个完整膜蛋白,由三个(细菌)或更多(真核生物)不同的疏水亚基,发挥质子通道作用。纯化的F1区域的ATPase活性不被寡霉素所抑制。

决定H+-ATPase对寡霉素敏感性的组分从牛心线粒体ATPase纯化,命名为寡霉素敏感赋予蛋白(oligomycin sensitivity-conferring protein, OSCP)。OSCP不含有寡霉素结合位点,替换的是F1F0部分之间的一个组分用于寡霉素的正确结合。F0部分的亚基6,亚基9决定了F-type H+-ATPase的寡霉素敏感性。

 

5、寡霉素的溶解性如何?

回答(MKBio):寡霉素是稳定化合物,pH3-737℃保存54h其抑制效率变化很少。几乎不溶于水,但能溶于水-有机溶剂混溶溶剂,比如乙醇、甲醇、DMSODMF和冰醋酸。通过溶于乙醇或DMSO并保存在冰箱内。在乙醇内的最大溶解度不超过10mM~8mg/ml)。

 

6、寡霉素的毒性如何?

回答(MKBio)寡霉素ABC腹腔注射到小鼠内的LD50s分别是1.52.98.3mg/kg体重。靶向HeLa细胞先对应的抑制浓度(IC50s)分别是0.0080.0150.106 mg/ml

 

7、寡霉素的其他特性如何?

回答(MKBio)寡霉素的熔点、近红外吸收光谱和旋光度,包括寡霉素DE,和Rutamycin B,参考学术资料。

Source:

NEUBERT D et al. The effect of oligomycin, gramicidin and other antibiotics on reversal of mitochondrial swelling by adenosine trisphosphate, Biochim Biophys Acta. 1962 Aug 27;62:556-65.

Gong Y et al. Oligomycin inhibits HIF-1α expression in hypoxic tumor cells. Am J Physiol Cell Physiol. 2005 May;288(5):C1023-9.

 

8、寡霉素的产品信息有哪些?

货号

名称

规格

货期

MZ8001-5MG

Oligomycin (Mixture of A, B, C) 寡霉素(ABC混合物)

5mg

现货

MZ8002-5MG

Oligomycin A 寡霉素A

5mg

现货

MZ8003-5MG

Oligomycin B 寡霉素B

5mg

现货

MZ8004-1MG

Oligomycin C 寡霉素C

1mg

3

MZ8008-500UG

Oligomycin D 寡霉素D

500μg

3

MZ8009-1MG

Oligomycin E 寡霉素E

1mg

3

MZ8010-1MG

21-hydroxy Oligomycin A 21-羟基寡霉素A

1mg

3

 

 

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

 

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